ระบบหลักห้าระบบของโครมาโตกราฟีของเหลวมีดังนี้:
1.ระบบหัวฉีด
โดยทั่วไปแล้ว เครื่องเก็บตัวอย่างการฉีดไดอะแฟรมหรือห้องฉีดแรงดันสูงจะใช้ในการดำเนินการฉีดให้เสร็จสมบูรณ์ และปริมาตรการฉีดจะคงที่
ซึ่งเป็นประโยชน์ในการปรับปรุงความสามารถในการทำซ้ำของตัวอย่างเชิงวิเคราะห์
2. ระบบการชง
ระบบประกอบด้วยสามส่วน: ปั๊มแรงดันสูง อ่างเก็บน้ำเฟสเคลื่อนที่ และเครื่องไล่ระดับ ความดันทั่วไปของปั๊มแรงดันสูงคือ 1.47~4.4X107Pa และอัตราการไหลสามารถปรับได้และมีเสถียรภาพ เมื่อเฟสเคลื่อนที่แรงดันสูงผ่านคอลัมน์โครมาโทกราฟี จะสามารถลดผลการแพร่กระจายของตัวอย่างในคอลัมน์และเร่งความเร็วการเคลื่อนที่ในคอลัมน์ได้ สิ่งนี้มีประโยชน์สำหรับการปรับปรุงความละเอียด การนำตัวอย่างกลับมา และการรักษากิจกรรมทางชีวภาพของตัวอย่าง ข้อผิดพลาดในการจัดเก็บเฟสเคลื่อนที่และตัวไล่ระดับสามารถเปลี่ยนเฟสเคลื่อนที่ได้ตามคุณสมบัติของเฟสที่อยู่นิ่งและตัวอย่าง รวมถึงการเปลี่ยนขั้วของตัวชะ ความแรงของไอออน ค่า pH หรือการสลับไปใช้วิธีอื่น
3.ระบบแยก
ระบบประกอบด้วยคอลัมน์โครมาโตกราฟี ท่อเชื่อมต่อ และเทอร์โมสตัท
โดยทั่วไปความยาวของคอลัมน์โครมาโตกราฟีคือ 10-50 ซม. (หากจำเป็นต้องใช้สองคอลัมน์ร่วมกัน สามารถเพิ่มท่อเชื่อมต่อระหว่างทั้งสองคอลัมน์ได้) โดยมีเส้นผ่านศูนย์กลางภายใน 2-5 มม. ทำจากสแตนเลสคุณภาพสูง หลอดแก้วหนา โลหะผสมไททาเนียม และวัสดุอื่นๆ คอลัมน์นี้มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 5-10 μ A เฟสคงที่ซึ่งมีขนาดอนุภาค m (ประกอบด้วยเมทริกซ์และของเหลวคงที่) ซึ่งเมทริกซ์ประกอบด้วยเรซินที่มีความแข็งแรงเชิงกลสูงหรือซิลิกาเจล ซึ่งทั้งสองอย่างนี้ มีลักษณะของความเฉื่อย (เช่นการกำจัดยีนซิลิเกตขั้นพื้นฐานบนพื้นผิวของซิลิกาเจล) ความพรุนและพื้นที่ผิวจำเพาะขนาดใหญ่ นอกจากนี้พื้นผิวยังถูกเคลือบด้วยกลไก (คล้ายกับการเตรียมเฟสคงที่ในแก๊สโครมาโตกราฟี) หรือควบคู่ทางเคมีกับยีนต่างๆ (เช่น หมู่ฟอสเฟต ควอเทอร์นารีเอมีน ไฮดรอกซีเมทิล ฟีนิล อะมิโน หรืออัลคิลของโซ่คาร์บอนที่มีความยาวต่างๆ) หรือลิแกนด์
ดังนั้นสารประเภทนี้ที่มีโครงสร้างสัมพัทธ์คงที่ต่างกันจึงมีการคัดเลือกที่ดี ตัวอย่างเช่น โดยการเชื่อมต่อพีเลคติน (PSA) เข้ากับพื้นผิวของซิลิกาเจลที่มีรูพรุน ไกลโคโปรตีนสามารถแยกได้จากไฟโบรบลาสต์ นอกจากนี้พลาสมิดเฟสคงที่มีขนาดเล็ก และเตียงคอลัมน์ง่ายต่อการบรรลุสภาวะที่สม่ำเสมอและหนาแน่น ซึ่งสามารถลดผลกระทบการแพร่กระจายของกระแสไหลวนได้อย่างมาก เมทริกซ์มีขนาดอนุภาคเล็กและมีรูพรุนขนาดเล็ก และตัวอย่างมีการถ่ายโอนมวลสั้นในบริเวณที่มีรูพรุนขนาดเล็ก สิ่งเหล่านี้มีประโยชน์ในการลดแบนด์วิดท์และปรับปรุงความละเอียด จากการวิเคราะห์ทฤษฎีประสิทธิภาพของคอลัมน์ ยิ่งขนาดอนุภาคเมทริกซ์มีขนาดเล็กลง ตัวเลขทางทฤษฎี N ของถาดก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น
4. ระบบตรวจจับ
มีเครื่องตรวจจับที่ใช้กันทั่วไปสามชนิดสำหรับโครมาโตกราฟีของเหลว: เครื่องตรวจจับ UV, เครื่องตรวจจับดัชนีการหักเหของแสงที่แตกต่างกัน และเครื่องตรวจจับเรืองแสง
เครื่องตรวจจับรังสียูวี
เครื่องตรวจจับนี้เหมาะสำหรับการตรวจจับตัวอย่างที่มีประสิทธิภาพการดูดซับแสงอัลตราไวโอเลต (หรือแสงที่มองเห็นได้)
ลักษณะของมัน: การใช้งานที่หลากหลาย (เช่นโปรตีน, กรดนิวคลีอิก, กรดอะมิโน, นิวคลีโอไทด์, เปปไทด์, ฮอร์โมน ฯลฯ สามารถนำมาใช้); ความไวสูง (ขีดจำกัดการตรวจจับที่ 10-10g/mL) ช่วงเชิงเส้นกว้าง ไม่ไวต่อการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิและอัตราการไหล สามารถตรวจจับตัวอย่างที่ถูกชะด้วยสารละลายเกรเดียนต์ได้
5. ระบบประมวลผลข้อมูล
ระบบนี้สามารถรวบรวม จัดเก็บ แสดง พิมพ์ และประมวลผลข้อมูลการทดสอบ ช่วยให้สามารถแยก จัดเตรียม หรือระบุตัวอย่างได้อย่างเหมาะสม
โดยสรุป โครมาโตกราฟีของเหลวประกอบด้วยระบบตัวอย่าง ระบบการให้สาร ระบบการแยก ระบบการตรวจจับ และระบบประมวลผลข้อมูล การผสมผสานระหว่างระบบเหล่านี้ทำให้การทดสอบมีความน่าเชื่อถือและมีเสถียรภาพมากขึ้น
